Étude phytochimique et évaluation des effets protecteurs de Matricaria pubescens sur la variation des paramètres biochimiques et oxydatifs chez des rats mâles de la souche Wistar recevant un régime hypergras

L’objectif de la présente étude consistait à l’identification des composés phytochimiques et l’évaluation des activités antioxydantes et biologiques in vitro présents dans l’extrait aqueux et éthanolique de Matricaria pubescens, et de mettre en évidence l’effet protecteur de la supplémentation de la poudre de M. pubescens sur l’obésité et ses complications chez des rats recevant un régime hypergras (HFD). L’analyse phytochimique des extraits de M. pubescens a révélé sa richesse en produits de métabolisme secondaire tels que les polyphénols et les flavonoïdes et possédait de nombreuses activités biologiques à savoir antioxydante, anti-inflammatoire et antidiabétique. Ainsi, dans le premier volet de cette thèse a été consacré à l’étude de la composition chimique et les propriétés antioxydante, anticholinestérases, anti-tyrosinase et antidiabétique des extraits de M. pubescens in vitro. La composition chimique de l’extrait éthanolique et aqueux a été déterminée par LC-MS/MS. Cette analyse a mis en évidence la présence de 30 composés phytochimiques dans l’extrait éthanolique de M. pubescens et 17 composés phytochimiques dans l’extrait aqueux. Ces extraits étaient dotés d’activités antioxydantes chélatantes et neutralisantes très importantes. De plus, les deux extraits présentaient une activité anticholinestérases et anti-tyrosinase et l’extrait éthanolique présentait une activité antidiabétique. Le deuxième volet de cette thèse a été consacré à l’étude in vivo de l’effet protecteur de la supplémentation de la poudre de M. pubescens sur l’obésité et ses complications chez des rats recevant un régime hypergras. Les résultats ont montré que le régime hypergras induisait une augmentation du poids corporel, de l'indice de masse corporelle, de la circonférence thoracique et abdominale, associée à une hypertrophie du foie et du tissu adipeux, ainsi qu'à une atrophie des reins et du cœur. Ce régime hypergras conduisait également à une augmentation des biomarqueurs hépatiques (ASAT, ALAT, ALP, bilirubines totales et directes) et rénaux (créatinine et acide urique) avec une hypertriglycéridémie et une hyperglycémie associée à une résistance à l’insuline. La lipotoxicité induite par le régime HFD a été associée à une perturbation du statut oxydant/antioxydant avec une augmentation des teneurs en MDA et en AOPP et une diminution de l’activité des enzymes antioxydantes (GPx, GST, SOD et catalase) ainsi que des niveaux de GSH réduits observés au niveau des organes étudiés. De plus, le régime HFD a conduit à une ugmentation du niveau de TNF-α hépatique comparativement au groupe témoin. Ces modifications biochimiques et oxydatives ont été confirmées par les données histologiques où l'on observait la présence de gouttelettes lipidiques, un gonflement et un ballonnement cellulaire avec une migration du noyau vers les périphéries et des hémorragies tissulaires au niveau hépatique. L’étude histologique rénale révélait la présence de dépôts lipidiques, une dilatation tubulaire et une atrophie glomérulaire avec dilatation de l’espace de Bowman. Tandis que l’histologie du tissu adipeux révélait une augmentation de la surface des adipocytes avec une diminution du nombre d'adipocytes par rapport au groupe témoin. Cependant, la supplémentation de la poudre de M. pubescens dans le groupe HFD a montré une amélioration considérable de tous les paramètres mentionnés précédemment. En conclusion, cette étude a indiqué que la poudre de M. pubescens avait un effet bénéfique contre l’obésité et ses complications grâce à sa richesse en composés phytochimiques qui lui conféraient un pouvoir hypolipidémiant, antioxydant et anti-inflammatoire.

Étude phytochimique de Moringa oleifera et exploration de ses effets thérapeutiques contre la cytotoxicité induite par l’abamectine chez la rate de la souche wistar

Cette étude vise à explorer la composition phytochimique et l'activité antioxydante de l'extrait aqueux des feuilles de M.oleifera, ainsi que ses effets protecteurs contre le stress oxydant induit par l'abamectine (ABM) dans les reins, le foie, les érythrocytes et le tissu cérébral des rats de la souche Wistar. Dans un premier temps, une analyse in vitro de l'extrait a été réalisée pour déterminer les teneurs en polyphénols totaux, flavonoïdes totaux, tanins condensés et ortho-diphénols totaux, ainsi que pour identifier les métabolites secondaires individuels présents dans l'extrait par HPLC et leurs principaux groupes fonctionnels par FTIR. De plus, l'activité antioxydante de l'extrait a été évaluée à l'aide de divers tests, notamment les essais de piégeage des radicaux DPPH et ABTS, le test de décoloration du β-carotène, le test FRAP, et la mesure de la capacité antioxydante totale. Ces analyses phytochimiques ont mis en évidence la richesse de M.oleifera en molécules bioactives ainsi que son puissant potentiel antioxydant. Dans un second temps, une étude in vivo a été menée sur vingt rats répartis équitablement en quatre groupes. Le premier groupe, servant de témoin, a reçu de l'eau distillée par gavage. Le deuxième groupe a été exposé à l’ABM via l'eau de boisson à une dose de 1 mg/kg de poids corporel. Le troisième groupe a reçu un traitement par l'extrait aqueux de M.oleifera (MO) à raison de 200 mg/kg de poids corporel par gavage. Enfin, le quatrième groupe a été soumis à une coadministration d’ABM et de l’extrait aqueux de M.oleifera, selon les mêmes modalités et aux mêmes doses, pendant une durée de trois semaines. En comparaison avec le groupe témoin, les résultats ont révélé que l’administration de l’ABM n’a induit aucune modification du poids corporel ni du poids absolu et relatif du cerveau. En revanche, une altération significative du poids absolu et relatif des reins et du foie a été observée, se traduisant par une atrophie rénale et une hypertrophie hépatique. Aussi, le traitement par l’ABM a significativement perturbé les paramètres hématologiques et entraîné une augmentation marquée des biomarqueurs biochimiques hépatiques et rénaux, notamment les niveaux des transaminases (ASAT, ALAT), de la phosphatase alcaline (PAL), de la gamma-glutamyl transférase (GGT), de la bilirubine libre et totale dans le foie, ainsi que de l’urée, de la créatinine et de l’acide urique dans les reins. Une élévation des concentrations de cholestérol et de triglycérides a également été constatée. Ces altérations ont été associées à un dysfonctionnement du système antioxydant, mis en évidence par une diminution significative des niveaux de GSH dans tous les organes étudiés ainsi que dans les érythrocytes. Parallèlement, une baisse de l’activité des enzymes antioxydantes a été constatée, notamment une réduction de l’activité de la glutathion peroxydase (GPx) dans le foie et les reins, de l’activité de la glutathion S-transférase (GST) dans tous les organes, de la superoxyde dismutase (SOD) dans le cerveau et de la catalase dans les érythrocytes. En outre, les niveaux de malondialdéhyde (MDA) étaient significativement augmentés dans l’ensemble des organes, tandis qu’une élévation des niveaux d’AOPP a été observée dans les reins. Dans le cerveau, aucune variation significative des niveaux de NO n’a été relevée, en revanche, l’activité de l’acétylcholinestérase a subi une diminution significative. Ces résultats ont été corroborés par des altérations histopathologiques, caractérisées par des lésions dégénératives sévères des glomérules, une congestion associée à une dilatation de l’espace de Bowman menant à une atrophie glomérulaire, ainsi qu’une dégénérescence hydropique tubulaire accompagnée de foyers de nécrose tubulaire, dans les reins. Dans le foie, une légère dilatation sinusoïdale a été observée, tandis qu’une vacuolisation marquée du neuropile a été mise en évidence dans le tissu cérébral. De manière intéressante, la supplémentation en MO chez les rats traités à l'ABM a amélioré de manière significative la majorité des paramètres étudiés. Afin de soutenir davantage les résultats obtenus, une modélisation computationnelle a été réalisée et a révélé que quelques molécules testées, y compris certaines présentes dans l'extrait étudié, se sont liées à la peroxyrédoxine 5 humaine, la catalase, et la glutathion peroxydase avec des affinités acceptables, ce qui, avec les interactions moléculaires établies et une bonne insertion, soutient de manière satisfaisante les résultats in vivo. Ainsi, on peut conclure que l'ABM altère la fonction du foie, des reins, du cerveau et des érythrocytes conduisant à des dommages oxydant, et ces effets pourraient être prévenus par l’extrait aqueux de M.oleifera, probablement en raison de son activité antioxydante.

Étude des effets protecteurs de l’huile d’Allium sativum et de la vitamine C contre la cytotoxicité induite par le tébuconazole chez le rat wistar.

Le screening phytochimique de l’huile d’Allium sativum a été réalisé par des méthodes standards. Les quantités en polyphénols totaux, en flavonoïdes et en tanins condensés ont été déterminées par des dosages spectrophotométriques. L’évaluation in vitro, du pouvoir antioxydant a été réalisée par différentes méthodes (DPPH, ABTS et CAT). Les résultats obtenus, après l’administration de TEB à raison de 100 mg/kg PC par voie orale pendant 4 semaines, montrent que ce fongicide entraîne une diminution du poids corporel et des altérations sévères des biomarqueurs hépatiques (transaminases, lactate déshydrogénase, phosphaatase alcaline, gamma glutamyl transpeptidase, protéines totales et albumine), rénaux (urée et créatinine), métaboliques (hyperglycémie, hyperlipidémie) et hématologiques. De même, le TEB a provoqué un stress oxydatif objectivé par une augmentation du taux de MDA, des PCO et des AOPP associée à une diminution de la teneur en GSH, en vitamine C, et de l’activité des différentes enzymes antioxydantes (SOD, CAT, GPx et GST) au niveau des organes étudiés. Un effet négatif cérébral (diminution de l’activité de l’enzyme acétylcholinestérase) a été également observé. Sur le plan histologique, la microscopie optique révèle une altération des tissus hépatiques (une congestion de la veine centrolobulaire et une infiltration des cellules inflammatoires) ainsi que du tissu rénal (une dilatation tubulaire et une dégénérescence de glomérule rénale). Cependant, la supplémentation en huile d’Allium sativum à 5 ml/kg PC et en vitamine C à raison de 200 mg/kg PC ont significativement amélioré tous les paramètres précédents et ont diminué l'effet indésirable de TEB. En conclusion, les résultats obtenus confirment que l’HAS et la Vit C diminuent la production des radicaux libres générés par le TEB, améliorent la défense antioxydante, et amoindrissent la sensibilité des tissus au stress oxydatif. Donc on peut considérer que l’atténuation des perturbations enregistrées avec le TEB semble possible par le renforcement des défenses antioxydantes d’organisme, par la supplémentation orientée sur l’HAS et la Vit C à fort potentiel protecteur.